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qPCR versus LAMP

qPCR versus LAMP

qPCR versus LAMP

La qPCR (PCR en temps réel) et la LAMP (amplification isotherme médiée par boucle) sont deux méthodes utilisées pour amplifier et détecter des séquences d’ADN spécifiques.

La qPCR est une méthode qui amplifie l’ADN à l’aide de la PCR (amplification en chaîne par polymérase) et mesure simultanément la quantité d’ADN amplifié à l’aide de colorants fluorescents. Le signal fluorescent augmente à mesure que la PCR amplifie l’ADN, et la quantité d’ADN amplifié peut être quantifiée en comparant le signal fluorescent à une courbe standard. La qPCR est très sensible et spécifique et peut être utilisée pour détecter et quantifier de petites quantités d’ADN.

LAMP est une méthode qui amplifie l’ADN à l’aide d’une amplification isotherme (aucun cycle de température n’est requis) et repose sur la liaison spécifique d’amorces à l’ADN cible. La réaction LAMP est suivie par détection visuelle de la turbidité ou de la fluorescence des produits amplifiés. LAMP est également une méthode hautement spécifique et peut être utilisée pour détecter de petites quantités d’ADN, mais elle est moins sensible que la qPCR et peut ne pas être en mesure de détecter des niveaux aussi faibles d’ADN cible.

En bref, la qPCR est une méthode quantitative qui utilise des colorants fluorescents pour détecter et quantifier l’ADN amplifié, tandis que LAMP est une méthode qualitative qui utilise la détection visuelle de l’ADN amplifié. Les deux sont utiles pour détecter et identifier des séquences d’ADN spécifiques.

La qPCR (polymérase en chaîne en temps réel) a plusieurs avantages par rapport à la LAMP (amplification isotherme en boucle):

Sensibilité: La qPCR est généralement plus sensible que la LAMP, ce qui signifie qu’elle peut détecter des niveaux plus faibles d’ADN cible.

Quantification: La qPCR permet de quantifier la quantité d’ADN amplifié grâce à l’utilisation de sondes fluorescentes. La LAMP est généralement utilisée pour la détection qualitative.

Précision: La qPCR est généralement plus précise que la LAMP dans la mesure de la quantité d’ADN cible.

Fiabilité: La qPCR est plus fiable car elle utilise un système de rétroaction en temps réel pour suivre l’amplification de l’ADN cible, ce qui permet d’éviter les faux positifs.

Temps d’analyse: La qPCR est généralement plus rapide que la LAMP, car elle nécessite moins de temps pour amplifier l’ADN cible.

Flexibilité: La qPCR peut être utilisée pour détecter des cibles multiples simultanément, tandis que la LAMP est généralement utilisée pour détecter une seule cible à la fois.

Il est important de noter que les avantages et les limites de la qPCR et de la LAMP dépendent des applications spécifiques et des besoins en matière de détection.

 

qPCR versus Boîte de Petri

qPCR versus Boîte de Petri

Boîte de Petri VERSUS qPCR

La PCR temps réel est reconnue pour permettre l’isolation, l’identification et la quantification de l’ADN des bactéries, virus, parasites, allergènes, OGM en un temps très court de l’ordre de 1 à 3h dans tous les domaines: hygiène alimentaire, santé animale et/ou santé humaine, industries cosmétiques…

Longtemps restreinte pour des raisons de prix  à la détection de quelques pathogènes en hygiène alimentaire ou aux produits à faible durée de vie, l’objectif du Professeur Michel Franck, PDG de ADNucleis, est  d’élargir les indications de cette technique PCR à l’identification et la quantification des indicateurs d’hygiène traditionnels (Flore totale, E.coli, coliformes, Pseudomonas spp., Listeria spp., moisissures, levures…) , et/ou  les pathogènes (Salmonelles, Listeria monocytogenes, Cronobacter sakazakii, les STEC comme E.coli O157H7, virus, parasites...). Cet objectif est aujourd’hui atteint grâce à une nouvelle méthode « de rupture » à prix équivalents aux prix des méthodes culturales.

Associée au robot PCR SEQUENCE PRO- beaucoup moins onéreux que les traditionnels automates pipeteurs- robot compact (65cm x 65cm) directement positionnable sur les chaînes de productions, l’analyse PCR temps réel peut être réalisée par un personnel non qualifié en biologie moléculaire, in situ et en temps réel.

Grâce à son entourage d’industriels partenaires comme l’entreprise Pasquier entre autre, ADNucleis  poursuit  sa dynamique pour faire de la PCR temps réel un standard industriel notamment par la simplification et la robotisation de l’ensemble du procédé analytique.

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